Ген за резистентност към карбапенеми (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Име на продукта
Комплект за откриване на HWTS-OT045 ген за резистентност към карбапенеми (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (флуоресцентна PCR)
Епидемиология
Карбапенемните антибиотици са атипични β-лактамни антибиотици с най-широк антибактериален спектър и най-силна антибактериална активност. Поради стабилността си към β-лактамази и ниската си токсичност, те са се превърнали в едно от най-важните антибактериални лекарства за лечение на тежки бактериални инфекции. Карбапенемите са силно стабилни към плазмид-медиирани β-лактамази с разширен спектър (ESBL), хромозоми и плазмид-медиирани цефалоспоринази (AmpC ензими).
Канал
| PCR-микс 1 | PCR-микс 2 | |
| ФАМ | ИМП | ВИМ |
| VIC/HEX | Вътрешен контрол | Вътрешен контрол |
| CY5 | НДМ | КПК |
| РОКС | OXA48
| OXA23 |
Технически параметри
| Съхранение | ≤-18℃ |
| Срок на годност | 12 месеца |
| Вид на образеца | Храчки, чисти колонии, ректален тампон |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| Лог на отклоненията | 103CFU/mL |
| Специфичност | а) Комплектът открива стандартизираните отрицателни референции на компанията и резултатите отговарят на изискванията на съответните референции. б) Резултатите от теста за кръстосана реактивност показват, че този комплект няма кръстосана реакция с други респираторни патогени, като Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, респираторен аденовирус, Enterococcus или проби, съдържащи други гени за лекарствена резистентност CTX, mecA, SME, SHV, TEM и др. в) Антиинтерференция: Муцин, Миноциклин, Гентамицин, Клиндамицин, Имипенем, Цефоперазон, Меропенем, Ципрофлоксацин хидрохлорид, Левофлоксацин, Клавуланова киселина, Рокситромицин са избрани за тест за интерференция и резултатите показват, че гореспоменатите интерфериращи вещества нямат интерферираща реакция при откриването на гени за резистентност към карбапенем KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM и IMP. |
| Приложими инструменти | Applied Biosystems 7500 PCR системи в реално време QuantStudio®5 PCR системи в реално време SLAN-96P PCR системи в реално време (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 система за PCR в реално време Система за откриване на PCR в реално време LineGene 9600 Plus (FQD-96A，ХанджоуБиоер технология) MA-6000 Количествен термоциклер в реално време (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 система за PCR в реално време BioRad CFX Opus 96 система за PCR в реално време |
Работен поток
Вариант 1.
Препоръчителен реагент за екстракция: Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (който може да се използва с автоматичен екстрактор на нуклеинови киселини Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) от Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Добавете 200 μL нормален физиологичен разтвор към утайката от талуса. Следващите стъпки трябва да следват инструкциите за екстракция, а препоръчителният обем на елуиране е100 μL.
Вариант 2.
Препоръчителен реагент за екстракция: Реагент за екстракция или пречистване на нуклеинови киселини (YDP302) от Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Екстракцията трябва да започне в стриктно съответствие със стъпка 2 от инструкциите за употреба (добавете 200 μL буфер GA към утайката от талуса и разклатете, докато талусът се суспендира напълно). Използвайте вода без RNase/DNase за елуиране, като препоръчителният обем за елуиране е 100 μL.
Вариант 3.
Препоръчителен реагент за екстракция: Реагент за освобождаване на проба за макро и микро-тест. Пробата от храчки трябва да се промие чрез добавяне на 1 mL нормален физиологичен разтвор към гореспоменатата обработена утайка от талус, центрофугиране при 13000 об/мин за 5 минути и супернатантът се изхвърля (запазете 10-20 µL от супернатантата). За чиста колония и ректален тампон, добавете 50 μL реагент за освобождаване на пробата директно към гореспоменатата обработена утайка от талус и следващите стъпки трябва да се екстрахират съгласно инструкциите за употреба.
